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分光光度計的原理是什么?

更新日期: 2015-11-11
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分光光度計是一種常用的分析儀器,可以將成分復(fù)雜的光分解為光譜線,具有雜散光更低、穩(wěn)定性好、可靠性強、分析更加準確等優(yōu)點。分光光度計的原理是什么呢?下面就來具體介紹一下,希望可以幫助用戶更好的應(yīng)用產(chǎn)品。

分光光度計的原理

分光光度計采用一個可以產(chǎn)生多個波長的光源,通過系列分光裝置,從而產(chǎn)生特定波長的光源,光線透過測試的樣品后,部分光線被吸收,計算樣品的吸光值,從而轉(zhuǎn)化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。

單色光輻射穿過被測物質(zhì)溶液時,被該物質(zhì)吸收的量與該物質(zhì)的濃度和液層的厚度(光路長度)成正比,其關(guān)系如下式:

A=-lg(I/I。)=-lgT=kLc

式中 :A 為吸光度;

基本原理

I。為入射的單色光強度;

I 為透射的單色光強度;

T 為物質(zhì)的透射率;

k 為摩爾吸收系數(shù);

L 為被分析物質(zhì)的光程,即比色皿的邊長;

c 為物質(zhì)的濃度;

物質(zhì)對光的選擇性吸收波長,以及相應(yīng)的吸收系數(shù)是該物質(zhì)的物理常數(shù)。當(dāng)已知某純物質(zhì)在一定條件下的吸收系數(shù)后可用同樣條件將該供試品配成溶液,測定其吸收度,即可由上式計算出供試品中該物質(zhì)的含量。在可見光區(qū),除某些物質(zhì)對光有吸收外,很多物質(zhì)本身并沒有吸收但可在一定條件下加入顯色試劑或經(jīng)過處理使其顯色后再測定,故又稱比色分析。由于顯色時影響呈色深淺的因素較多,且常使用單色光純度較差的儀器,故測定時應(yīng)用標準品或?qū)φ掌吠瑫r操作。


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